分光光度计的核心检测原理是基于物质对特定波长光的选择性吸收，并遵循朗伯-比尔定律（Lambert-Beer Law） 进行定量分析。具体原理可分解如下：
选择性吸收与分光特性：
物质分子中的电子在特定能量（对应特定波长）的光照射下会发生能级跃迁，吸收该波长的光。不同物质的分子结构不同，因此具有独特的吸收光谱（即对不同波长光的吸收程度不同）。分光光度计的核心功能是将复合光（如白光）通过单色器（棱镜或光栅）分解为单色光（单一波长），然后选择特定波长的光照射样品。
朗伯-比尔定律（定量基础）：
当一束单色光穿过均匀透明的样品溶液时，光被吸收的程度（吸光度 A）与溶液中吸光物质的浓度（c）及光穿过的路径长度（吸收池厚度 l）成正比23。数学表达式为：
A = ε × c × l
其中：
A 为吸光度（无单位）。
ε 为摩尔吸光系数（或吸光系数），是与吸光物质性质、入射光波长及温度有关的常数（单位：L·mol⁻¹·cm⁻¹ 或 L·g⁻¹·cm⁻¹）。
c 为吸光物质的浓度（单位：mol/L 或 g/L）。
l 为光程长度，即吸收池的厚度（单位：cm）。
该定律表明，在固定光程厚度下，吸光度 (A) 与样品浓度 (c) 呈线性关系，这是分光光度计进行定量分析的根本依据。
工作原理流程简述：
光源（如紫外区用氘灯、可见区用钨灯/卤钨灯）发出连续光谱。
单色器将复合光色散，并通过狭缝选择出特定波长的单色光。
单色光通过装有待测样品的吸收池（比色皿），部分光被样品吸收。
检测器（如光电管、光电倍增管）接收透过样品的光，将其光强度信号转换为电信号。
信号处理系统计算并显示吸光度 A（或透光度 T），公式为 A = log₁₀(I₀/I)，其中 I₀ 是入射光强度，I 是透射光强度。
根据测得的 A 和已知的 ε、l，或利用标准曲线（一系列已知浓度标准溶液的 A 值绘制），即可计算出未知样品的浓度 。
总结核心原理： 分光光度计通过将光分解为单色光，测量物质对特定波长光的吸收程度（吸光度），并依据朗伯-比尔定律所揭示的吸光度与浓度之间的线性关系，实现对溶液中特定组分浓度的定量测定。
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