分光光计数值如何换算？

分光光度计测量数值的换算主要包括透光度（T）与吸光度（A）之间的换算，以及吸光度与待测物质浓度（c）的换算。具体方法如下：

一、透光度（T）与吸光度（A）的换算
两者遵循‌对数关系‌，公式为：
‌A = -log₁₀T \quad 或 \quad A = log₁₀(1/T)‌
其中：

T 为透光度（以小数或百分比表示，如 50% 需转换为 0.5）；
A 为吸光度（无量纲）。
‌换算示例‌：
若 T = 10%（即 0.1），则 A = -log₁₀(0.1) = 1；
若 A = 0.5，则 T = 10⁻⁰·⁵ ≈ 0.316（即 31.6%）。
透光度 T (%)    吸光度 A
100    0
50    0.301
10    1
1    2
二、吸光度（A）与浓度（c）的换算
需依据‌朗伯-比尔定律‌和‌标准曲线法‌：

‌朗伯-比尔定律‌：
‌A = ε · c · l‌

ε：摩尔吸光系数（L·mol⁻¹·cm⁻¹），与物质性质及波长相关；
l：比色皿光程（cm），通常为 1 cm；
c：溶液浓度（mol/L 或 g/L）。
‌注‌：该公式仅适用于已知 ε 且浓度较低（A < 1）的溶液。
‌标准曲线法（实际常用）‌：
通过已知浓度标准溶液建立 A-c 校准曲线，步骤：

配制一系列浓度梯度（c₁, c₂, ..., cₙ）的标准溶液；
分别测定吸光度（A₁, A₂, ..., Aₙ）；
以 c 为横坐标、A 为纵坐标绘制散点图，拟合直线方程 ‌A = k₁ · c + k₀‌；
k₁：斜率，与 ε·l 相关；
k₀：截距（通常接近 0，反映背景吸收）。
将待测样品的 A 代入方程，计算浓度 c。
‌示例‌：
若标准曲线方程为 ‌A = 0.1767c + 0.0053‌，测得样品 A = 0.012，则：
‌c = (0.012 - 0.0053) / 0.1767 ≈ 0.038 g/L‌。

三、关键注意事项
‌吸光度范围‌：测量时 A 宜控制在 ‌0.1~1.0‌ 之间（T 在 10%~80%），超出此范围误差增大；
‌背景校正‌：需用空白溶液调零（T = 100%, A = 0）；
‌单位一致性‌：浓度 c 的单位需与标准曲线一致（如 mg/L 或 mol/L）。
综上，分光光度计数值换算的核心是 ‌透光度-吸光度的对数转换‌ 和 ‌基于标准曲线的浓度反演‌